Screening ad alto contenuto: dalle grandi librerie ai risultati funzionali

Lo screening ad alto contenuto basato sull'immagine è un potente strumento per misurare sistematicamente la perturbazione del fenotipo cellulare su un determinato trattamento. Questa tecnologia, combinata con l'interferenza del RNA, il CRISPR-Cas9 e le piccole molecole genera un metodo completo con cui decifrare ed eventualmente sintonizzare complessi processi biologici, come i mutamenti della morfologia cellulare, della cellula stessa e della proliferazione, il tutto reso possibile dalla robotica innovativa disponibile, dai sistemi di imaging e computazionali che aumentano la scala e la velocità dell'analisi.
Microscopi fluorescenti ad alto contenuto consentono di valutare sistematicamente l'espressione e la localizzazione di molteplici biomarcatori che possono essere ripresi simultaneamente utilizzando diverse lunghezze d'onda. L'integrazione di imaging ad alto contenuto con l'analisi automatica delle immagini consente di monitorare più parametri fisici e logici, generando così un'immagine multidimensionale di qualsiasi processo biologico. Nel contributo verranno descritti diversi esempi di screening ad alto contenuto basati sull’immagine che ci hanno permesso di identificare con successo i risultati funzionali partendo da grandi raccolte di molecole con funzione sconosciuta.